بررسی پایداری dna اشریشیا کلی روی کارت نگهداری dna برای انجام آزمایشهای مولکولی
نویسندگان
چکیده
هدف: برای نگهداری dna میکروارگانیسمها از روشهای سنتی نگهداری در دمای پایین 4،20- و80- درجه سانتیگراد استفاده میشود. کارت dbc یک روش نوین نگهداری dna در دمای اتاق است. پژوهش حاضر بهمنظور بررسی پایداری dna باکتری و تعیین بهترین روش نگهداری dna روی کارت نگهداری dna طراحی شد. مواد و روشها: از یک جفت آغازگر از قسمت حفاظت شده دومین 16 srrna برای شناسایی اشریشیا کلی استفاده شد و چهار نوع مختلف نمونه باکتریایی شامل سوسپانسیون باکتری، dna خالص باکتری به روش فنل- کلروفرم، باکتری لیز شده با بافر لیز کننده و dna باکتری با روش جوشاندن تهیه و در روی کارت جداگانه ریخته و در دمای اتاق خشک شد. سپس در زمانهای 3 ،5 و 7 ماه پایداری dna باکتری اشریشیا کلی با دو روش مولکولی pcr مرسوم با تعداد 1، 2، 3 دیسک (به قطر 1 میلیمتر) بهعنوان منبعی از dna باکتری و real-time pcr بررسی شد. نتایج: dna باکتری پس از هفت ماه روی یک دیسک از کارت نگهداری dna پایداری خود را حفظ نمود و حتی یک پانچ از دیسک بهعنوان منبع dna کافی بود. اما نتایج بررسی حاضر نشان داد که سوسپانسیون باکتری بهترین روش نگهداری طولانی مدت dna باکتری روی کارت نگهداری dna است. نتیجهگیری: در روشهای سنتی نگهداری dna، پس از منجمد و ذوب شدن dna کیفیت آن کاهش مییابد اما در روش کارت نگهداری dna کیفیت dna برای زمان طولانیتر حفظ میشود و علاوه برآن این روش مزایایی مانند آسانی در کارکردن با نمونه، قیمت پایین، تخلیص سریعتر و در نهایت کاهش آلودگی فردی و محیطی را دارد.
منابع مشابه
تشخیص باکتری های اشریشیا کلی و شیگلا با استفاده از تکثیر همدمای حلقوی dna
اشریشیا کلی انتروهموراژیک و شیگلا باسیل های گرم منفی متعلق به خانواده انتروباکتریاسه هستند که نگرانی عمومی غالب در کشورهای توسعه یافته و کشورهای در حال توسعه می باشند. به علت اینکه دز آلوده کنندگی در این باکتری ها پایین است، نقش روش های تشخیصی در این زمینه اهمیت یافته است. برای تشخیص این باکتری ها روش های تشخیصی مرسوم مانند کشت آن ها و تست های بیوشیمیایی استفاده می-شود که روش های پیچیده، پر زحم...
جداسازی Anti-dsDNA IgG به‌وسیله تست الایزا غیر مستقیم از دو منبع مختلف ds-DNA؛ اشریشیا کلی و تیموس گوساله
Background: Anti-dsDNA antibodies frequently found in the sera Systemic Lupus Erythematosus patients, particularly in active disease stage. Nowadays exploit different eukaryotic and prokaryotic dsDNA as antigen source and different reagents as binder. The aim of this study to compared two dsDNA different sources and tow different kinds of reagents for binder in ELISA test. Methods: In this stu...
متن کاملتعیین پاتوتیپ جدایه‌های اشریشیا کلی از گوساله و طیو ر در ایران با استفاده از روش ریزآرایه DNA
زمینه مطالعه: ردیابی ژن‌های مربوط به عوامل حدت که در یک سویه از اشریشیا کلی‌‌حضور دارند جهت تعیین پروفایل ژنوتیپی و همچنین قرارگیری سویه در پاتوتیپی خاص از اهمیت فوق العاده‌ای برخوردار است. هدف: هدف از انجام این مطالعه تعیین پاتوتیپ جدایه های مختلف E. coli جدا شده از گوساله‌ها و طیور بومی ایران با استفاده از تکنیک ریزآرایه می باشد. روش کار: در مطالعه حاضر تعداد 67 جدایه از اشریشیا کلی پـ...
متن کاملبررسی حضور 8 ژن اشریشیا کلی پاتوژنیک طیور در اشریشیا کلی اوروپاتوژنیک انسان
سابقه و هدف: طیف وسیعی از عفونت های خارج روده ای در انسان و حیوانات به وسیله سویه های اشریشیا کلی خارج روده ای (EXPEC) ایجاد می شوند. از آن جمله می توان به سویه های APEC (عامل بیماریزای طیور) و UPEC (عامل عفونت دستگاه ادراری در انسان) اشاره نمود. این مطالعه با هدف مقایسه حضور 8 ژن بیماریزایی در دو سویه UPEC و APEC و بررسی فرضیه نقش کلی باسیل های جدا شده طیور به عنوان منبع مناس...
متن کاملبررسی مقاومت به آنتی بیوتیکهای بتالاکتام در جدایه‌های اشریشیا کلی و جستجوی مولکولی اشریشیا کلی O157:H7 در پرندگان زینتی شهرکرد
مقدمه : پرندگان زینتی میتوانند عوامل بیماریزای انسانی را در خود جای دهند و در انتقال و گسترش عوامل عفونی مقاوم به دارو به انسان نقش داشته باشند. با توجه به علاقه بسیاری از مردم در نگه داری از پرندگان زینتی، مطالعه حاضر با مطالعه بر روی پرندگان زینتی شهرکرد، اشریشیا کلیهای مقاوم به آنتی بیوتیکهای بتالاکتام و جستجوی مولکولی اشریشیا کلی O157:H7 بررسی شدند. شایان ذکر است اشریشیا کلی O157...
متن کاملبررسی حضور 8 ژن اشریشیا کلی پاتوژنیک طیور در اشریشیا کلی اوروپاتوژنیک انسان
سابقه و هدف: طیف وسیعی از عفونت های خارج روده ای در انسان و حیوانات به وسیله سویه های اشریشیا کلی خارج روده ای (EXPEC) ایجاد می شوند. از آن جمله می توان به سویه های APEC (عامل بیماریزای طیور) و UPEC (عامل عفونت دستگاه ادراری در انسان) اشاره نمود. این مطالعه با هدف مقایسه حضور 8 ژن بیماریزایی در دو سویه UPEC و APEC و بررسی فرضیه نقش کلی باسیل های جدا شده طیور به عنوان منبع مناس...
متن کاملمنابع من
با ذخیره ی این منبع در منابع من، دسترسی به آن را برای استفاده های بعدی آسان تر کنید
عنوان ژورنال:
پژوهش های آسیب شناسی زیستیجلد ۱۴، شماره ۴، صفحات ۹۹-۱۰۷
میزبانی شده توسط پلتفرم ابری doprax.com
copyright © 2015-2023